Продукт онкогена src

Один из первых был идентифицирован продукт онкогена src, который преципитировался в лизатах трансформированных RSV клеток сывороткой кроликов (TBR) с опухолями, индуцированными RSV [Brugge J. S. et al, 1977, 1979]. Установлено, что этот белок одновременно и фосфорилирован и обладает фосфопротеинкиназной активностью, имеет молекулярную массу 60 000 (pp60src), синтезируется непосредственно информационной 21S РНК, минуя стадию предшественника.

Белок pp60src является единственным большим продуктом трансляции 21S РНК. Никаких особых отличий в первичной структуре этого белка не обнаружено [Brugge J.S. et al, 1979; Weiss S. R. et al, 1981]. При получении лизатов из клеток, трансформированных RSV, pp60src легко превращается в продукт p52src [Wells S. К, Collett M. S, 1983].

Протеолитическое расщепление pp60src до p52src зависит от условий разрушения клеток. Показано, что оба белка могут фосфорилировать IgG в сыворотке TBR, но только pp60src способен к аутофосфорилированию.

Период полужизни pp60src составляет 30 — 60 мин [Ziemiecki A, Ffiss R. R, 1980]. pp60src является метаболически стабильным белком и фосфорилируется через 10 — 25 мин после начала синтеза [Brugge J. S. et al, 1979]. Анализ первичной структуры pp60src показал, что этот белок содержит 526 аминокислот и несколько сайтов фосфорилирования по тирозину и серину [Takeya Т. et al, 1982].

Между продуктами src-генов RSV штамм Шмидт — Руппин (SR-RSV) и восстановленных вирусов сарком птиц (rASV) обнаружены два существенных различия. Во-первых, имеются отличия в нуклеотидной последовательности, приводящие к изменению значительной части аминокислотной последовательности в pp60src.

Во-вторых, 24 нуклеотида в участке слева от src-кодирующей последовательности, присутствующих в rASV1441, в SR-RSV отсутствуют [Takeya Т. et al., 1982]. В cвязи с этим следует обратить внимание на то, что спектр антител к pp60src зависит не только от штамма ASV, но и от вида животного, у которого вызывались опухоли.

У мармозеток, например, антитела вырабатывались в высоком титре с широким спектром действия, т. е. к pp60src любого штамма ASV. Напротив, у кроликов с опухолями, индуцированными штаммами Брайан или Братислава, или у хомяков с опухолями, вызванными SR-RSV, не обнаружено антител к pp60src любого штамма ASV [Brugge J. S. et al., 1979].

Получены данные, свидетельствующие о значительном полиморфизме pp60src вируса сарком птиц (ASV) [Beemon К. et al., 1979]. Молекулярная масса синтезируемых in vitro продуктов гена src колебалась в пределах 56 000 — 60 000.

В крысиных клетках линии 3Y1, трансформированных SR-RSV, с помощью сыворотки TBR выявлен белок с молекулярной массой в 120 000 [Hirai R. et al., 1982]. Считают, что P120 состоит из 2 молекул pp60src, повторяющихся в тандеме. Показано, что 21S РНК кодирует pp60src, a 28S РНК — Р120.

Эти данные подтверждены в опытах по трансляции обоих видов РНК в бесклеточной системе in vitro. При исследовании структуры гена src G. Mardon и Н. Varmus (1983) получили факты, позволяющие предполагать, что с внутреннего АУГ-кодона этого гена RSV дикого типа может синтезироваться полипептид с молекулярной массой 7000.

«Онкогены и канцерогенез», А.И.Агеенко

Популярные статьи раздела