В исследованиях А. Е. Минаева и др. проведено сопоставление результатов определения токсичности на «лимфатическом сосуде» с результатами ее определения на мышах с блокированной РЭС. С этой целью мы пытались придать нарушениям, регистрируемым при микроскопии лимфатического сосуда, количественный характер.
Степень спазма (или паралича) лимфатического сосуда определялась по отношению к исходной площади просвета микроскопируемого лимфатического сосуда. Биологическая токсичность на мышах оценивалась в условных единицах. Проба ставилась следующим образом.
Внутривенно вводили тушь (фирма Гюнтера — Вагнера, С — 11/14 31а) с размером частиц около 30 нм, что вызывало блокаду ретикулоэндотелиальной системы. Через 30 — 40 мин внутрибрюшинно вводили от 0,5 до 2 мл исследуемой биологической среды (плазма крови, сыворотка крови, лимфа, спинномозговая жидкость). Во избежание случайных результатов каждую пробу испытывали на группе 3 — 5 мышей.
Токсичность оценивали: 5 усл. ед. — смерть мышей в течение первых часов после введения исследуемой среды; 4 усл. ед. — смерть в течение первых суток; 3 усл. ед. — смерть после первых суток; 2 усл. ед. — мыши выживали, но была выражена патологическая реакция, определявшаяся по внешнему виду животных, их поведению, количеству съедаемого корма и т. д.; 1 усл. ед. — слабая реакция, определявшаяся по тем же показателям общего состояния. Если реакция отсутствовала, ставили ноль.
Проба на токсичность
№ п/п | Число наблюдений в серии опытов | На мышах с блокированной РЭС (степень токсичности) | На лимфатическом сосуде | |
спазм сосуда (% от исходного) | расширение ( % от исходного) | |||
1 | 6 | 0 | 0 | — |
2 | 5 | 1 | 10 — 15 | — |
3 | 7 | 2 | 20 — 25 | — |
4 | 7 | 3 | 30 — 50 | 15 — 18 |
5 | 10 | 4 | 50 — 70 | 15 — 25 |
6 | 12 | 5 | 80 — 100 | 25 — 35 |
Выявляется высокая степень корреляции результатов, полученных при определении степени спазма (или паралича) сосуда со степенью токсичности биологической жидкости, определенной на мышах с блокированной РЭС (r = 0,9, р < 0,001).
Следует отметить, что при биологической токсичности III степени при анализе изменений лимфатического сосуда выявлена спастическая реакция на воздействие плазмой крови, взятой от 5 обследуемых паралитическая — от 2 больных. При IV степени биологической токсичности это соотношение составило 6:4, при V — 5:7.
Эта показывает, что паралитический тип реакции характерен для более высокой степени интоксикации организма. В отличие от определения токсичности на мышах с блокированной РЭС выявление типа реакции (спастический — паралитический) позволяет давать соответствующие рекомендации лечения для улучшения лимфатического дренажа тканей.
«Отмывание» микроскопируемого сосуда теплым (36 — 38 °С) изотоническим раствором хлорида натрия в течение 5 — 10 мин оказывается достаточным, чтобы полностью восстановились исходная микроциркуляция крови и лимфоток.
При этом восстанавливается и чувствительность к последующему определению токсичности.
Таким образом, на одном сосуде можно проводить до 15 — 20 определений токсичности. Естественно, что при этом необходимы адекватный наркоз и поддержание общего состояния лабораторного животного. Тест оправдал себя в клинической практике.
«Основы лечебной лимфологии»,
Ю.М.Левин