Снижение активности фермента в ткани печени

Наиболее эффективным ингибитором СОМТ печени мышей в опытах in vivo оказался D-циклосерин, который через 2 ч после внутрибрюшинного введения в дозах 3000 и 6000 мг/кг веса вызывал снижение активности фермента в ткани печени соответственно на 30 и 64% (смотрите таблицу ниже).

Снижение активности СОМТ в ткани печени мышей после внутрибрюшинного введения D-циклосерина

* Приведены значения Ẋ±tS_Ẋ при n=6-8 и Р=0,05.
** Мышам ежедневно в течение 7 дней вводили указанную дозу D-циклосерина; время забоя указано после последней инъекции.
*** Мыши предварительно в течение 8 дней получали корм без пиридоксина.

D-циклосерин вызывал наиболее глубокое торможение СОМТ в печени мышей, предварительно получавших диету, лишенную пиридоксина. При многократном парентеральном введении D-циклосерина мышам действие препарата в отношении СОМТ печени усиливалось; добавление пиридоксаль-Р в пробы in vitro частично восстанавливало активность фермента. По-видимому, степень торможения СОМТ D-циклосерином in vivo в значительной мере зависит от концентрации пиридоксаль-Р в ткани. В селезенке и в асцитных клетках мышей, больных лейкозом Граффи, отличающихся по сравнению с тканью печени низким уровнем содержания пиридоксаль-Р, торможение СОМТ под влиянием парентерального введения D-циклосерина было значительно более глубоким, чем в печени животных (в таблице выше и ниже).

Снижение активности СОМТ в ткани селезенки мышей, больных лейкозом Френд, и в асцитных клетках мышей, больных лейкозом Граффи, после внутрибрюшинного введения D-циклосерина

* Приведены значения Ẋ±tS_Ẋ — при n—6—8 и р—0,05.

Следует подчеркнуть, что фактическое торможение СОМТ печени мышей D-циклосерином in vivo значительно превышало ожидаемое торможение фермента при условии равномерного распределения антиметаболита в организме и снижении концентрации циклосерина в системе при приготовлении экстракта ткани и определении активности фермента in vitro. По-видимому, глубокое торможение СОМТ печени и селезенки мышей D-циклосерином в опытах in vivo связано с образованием в организме аминооксипроизводных D-циклосерина, сродство которых к ферменту на 2—3 порядка выше, чем у D-циклосерина- Синтезированные нами производные антибиотика D-циклосерина β-аминокси-D-аланин и 3,6-диондикетопиперазин β-аминооксиаланина в опытах in vitro с экстрактами ткани печени мышей оказались весьма активными, сравнительно с D-циклосерином, ингибиторами СОМТ (смотрите таблицу ниже).

Ингибирующее действие аминооксипроизводных D-циклосерина на активность СОМТ печени мышей

Однако при парентеральном введении мышам максимально переносимых доз β-аминоокси-D-аланина (2 г/кг веса) или 3,6-диона-дикетопиперазина β-аминооксиаланина (3,7 г/кг) за 2 ч до забоя торможение СОМТ печени не превышало в среднем 30%, причем фермент в значительной степени реактивировался и в присутствии пиридоксаль-Р. Возможно, указанные антиметаболиты сравнительно плохо проникают в клетки или весьма быстро реагируют с различными карбонильными соединениями, что приводит к резкому снижению концентрации ингибитора в организме.

Полученные данные привели нас к выводу, что D-циклосерин в опытах in vivo является наиболее эффективным ингибитором СОМТ и, очевидно, вызывает глубокое торможение фермента в результате превращения в клетке в аминооксидериваты, отличающиеся высоким сродством к пиридоксаль-Р в активном центре фермента. Поскольку комплексы фермент — ингибитор, образующиеся при взаимодействии СОМТ с D-циклосерином, β-аминоокиси-D-аланином или 3,6-дион-дикетопиперазином β-аминооксиаланина, относительно легко диссоциируют и фермент реактивируется в присутствии пиридоксаль-Р, в первоначальных опытах для более глубокого хронического снижения активности СОМТ в ткани печени и селезенки мы вводили D-циклосерин мышам, содержавшимся на рационе, лишенном витамина В₆.

«Роль эндогенных факторов в развитии лейкозов»,
под ред. проф. М.О. Раушенбаха

Популярные статьи раздела