Лабораторная диагностика (Вирусоскопия отправленного материала)

В лаборатории производят вирусоскопию — мазки окрашивают методом серебрения по М.. А. Морозову и рассматривают под микроскопом с помощью иммерсионной системы. При положительном результате обнаруживают тельца Пашена в виде округлых образований диаметром 200 — 300 мкм темно-коричневого или черного цвета, лежащих поодиночке, парами, короткими цепочками или скоплениями. Положительные находки чаще бывают в жидкости из везикул. Результат получают через 30 — 60 мин. Исследования должен проводить высококвалифицированный вирусолог, ибо в мазках могут быть включения, сходные с тельцами Пашена.

Более достоверным является метод электронной микроскопии, но он сложный и не везде применим. Результат получают через 2 — 3 ч. Выделение вируса проводят путем заражения материалом от больного 12-дневных куриных эмбрионов на хорион-аллантоисную оболочку или однослойной культуры клеток (кожно-мышечная ткань эмбриона человека, перевиваемая ткань амниона человека, ткань почек обезьян). При положительном результате через 2 — 3 дня на хорион-аллантоисной оболочке появляются мелкие (диаметром 1 мм) белые, резко отграниченные возвышающиеся бугорки (оспины). При этом куриный эмбрион остается живым.

При отрицательном результате проводят повторное заражение куриных эмбрионов (второй пассаж). При отсутствии специфических поражений и во втором пассаже считают результат отрицательным.

В однослойной культуре клеток при положительном результате через 24 ч начинает проявляться цитопатическое действие вируса в виде развития изолированных очагов дегенерации с большим количеством гигантских клеток. Процесс заканчивается полной деструкцией клеточного пласта с отпадением клеток от стенок пробирки (С. С. Маренникова, 1960). Через несколько часов после заражения в клетках монослоя образуются тельца Гварниери, максимальное количество которых обнаруживаются через 72 — 96 ч.

По данным С. С. Маренниковой (1966), с помощью этого метода вирус натуральной оспы можно отличить от вируса вакцины и коровьей оспы. Цитопатическое действие вируса вакцины распространяется сразу на весь клеточный пласт, при этом островки дегенеративно измененных клеток соединены между собой цитоплазматическими мостиками, чего не бывает при заражении вирусом оспы.

«Руководство по воздушно-капельным инфекциям», И.К.Мусабаев

← Назад
Вперед →