Зачатки конечностей затем культивируют или на миллипористых фильтрах в соответствии с методикой Trowell, или путем погружения в медленно вращающиеся сосуды, заполненные питательной средой. Эксплантаты можно поддерживать жизнеспособными в виде культур по меньшей мере 5 — 6 дней, в течение которых они разовьются до стадии, соответствующей стадии развития in vivo за тот же срок.
Культивированные эксплантаты затем фиксируются, окрашиваются, просветляются и оцениваются по системе оценки, предусматривающей начисление баллов за наличие различных длинных костей и скелета лапы. Количество образовавшегося коллагена можно оценить количественно биохимически или путем микропланиметрии окрашенных срезов.
Эта система широко используется для опытов с тератогенными веществами, в отношении которых уже было установлено, что они вызывают пороки развития скелета, было показано, что применение тест-системы этого вида дает возможность получать воспроизводимые зависимости доза — эффект. Культуры зачатков конечностей мышей также можно использовать для оценки претератогенов, которые нуждаются в метаболических превращениях, для того чтобы стать эмбриотоксичными.
Были успешно применены три следующих метода:
Последний способ напоминает тест Ames для выявления промутагенов. Использование системы с культурами клеток для оценки потенциальных тератогенов также было изучено.
«Клиническая фармакология при беременности», Х.П.Кьюмерле