Бактериоскопическое исследование мокроты (Окраска по Граму)

Окраска по Граму

  1. Для окраски готовят впрок красящие бумажки, Растворяют 2 г генцианвиолета (замена: метилвиолет, кристалвиолет) в 100 мл 95° спирта и добавляют 5 г глицерина. Этим раствором хорошо пропитывают листки фильтровальной бумаги, положенные на стекло, и дают им высохнуть. Затем разрезают на полоски размером несколько уже и короче предметного стекла. Хранят в закрытой баночке.
  2. Приготовляют раствор Люголя: 1 г иода и 2 г йодистого калия на 300 мл дестиллированной воды.
  3. 1 г нейтральрота растворяют в 100 мл воды (можно заменить фуксином Циля, разведенным в 10 раз водой).

Мазок фиксируют на пламени спиртовой горелки, проводя стекло через огонь 3 раза намазанной стороной кверху. На препарат накладывают красящую бумажку (1), смачивают ее несколькими каплями дестиллированной воды и через 1 минуту снимают пинцетом.

Слегка споласкивают дестиллированной водой и наливают на 1 минуту раствор Люголя (2). Затем раствор сливают, а препарат обесцвечивают в стаканчике со спиртом до тех пор, пока не перестанет отходить краска (несколько секунд). Споласкивают дестиллированной водой, красят 1—2 минуты раствором нейтральрота (3) и смывают дестиллированной водой.

Если для докраски применяют разведенный фуксин (3), для смывания красок с препарата пользуются простой водой. В препарате, окрашенном по Граму, можно обнаружить грамположительных (фиолетовых) пневмококков, имеющих характерную удлиненную форму «пламени свечи» с иногда видимой неокрашенной капсулой вокруг пары кокков, диплобацилл Фридлендера (пневмобацилл) — крупные грамотрицательные (красные) палочки, расположенные ларами, грамположительных стрептококков, стафилококков и иную флору.

«Справочник практического врача», П.И. Егоров