Вернуться к содержанию  Вернуться к содержанию
Главная / Молекулы и клетки / Автоматический синтез белков / Отрыв пептидной цепи от твердой основы

Отрыв пептидной цепи от твердой основы

После того как вся требуемая последовательность аминокислот будет собрана, пептидную цепь отрывают от твердой основы путем избирательного расщепления связи, удерживавшей вместе цепь и поддерживающую основу на протяжении всего процесса синтеза.

Пептидная цепь в первый раз оказывается в свободном состоянии, и теперь ее можно растворить и отделить от твердой основы. После того как она перейдет в раствор, выполняют обычные операции очистки.

Прежде чем эта схема воплотится в последовательность налаженных операций, надо потрудиться над тем, чтобы обеспечить выполнение ряда довольно жестких требований, касающихся природы твердой основы, типа связи, скрепляющей пептидную цепь с основой, и выбора защитных групп и активирующих реагентов.

Характеристики твердой основы

Твердая основа должна быть совершенно нерастворима во всех растворителях, которые могут быть использованы в ходе синтеза и при последующей отмывке; она должна быть физически прочной и удобной для проведения фильтрования и других манипуляций; она должна иметь реакционноспособный центр, к которому будет прикреплена пептидная цепь, но во всех других отношениях должна быть химически инертна и устойчива; наконец, для того чтобы можно было синтезировать достаточные количества пептида, твердая основа должна либо иметь большое отношение поверхности к объему, либо быть легко проницаемой для растворимых реагентов.

Линейный полимер стирола

После довольно продолжительных поисков был найден материал, удовлетворяющий всем этим требованиям. Это полистирольная смола — линейный полимер стирола, в котором цепи стирола нежестко связаны дивинилбензолом; она имеет вид шариков диаметром около 50 микрон.

Подбор числа поперечных связей

Число поперечных связей подбирали таким образом, чтобы смола имела большой молекулярный вес и была нерастворимой, но в то же время могла сильно разбухать в органических растворителях. Тогда шарики легко пропускали растворенные реагенты и реакция могла идти не только на поверхности этой желеобразной матрицы, но также в ней самой, внутри нее.

Хотя речь идет о шариках, которые как отдельные частицы едва различимы невооруженным глазом, но по сравнению с аминокислотами и даже с белками они неимоверно велики; каждый шарик может удерживать 1012 (один триллион) пептидных цепей!


«Молекулы и клетки», под ред. акад. Г.М.Франка

Популярные статьи разделаПопулярные статьи раздела