Продукт трансформирующего гена abl A-MuLV

Продуктом трансформирующего гена abl A-MuLV является слитный, сильно кислый (рН 4,2) белок P120gag-abl, содержащий пептиды структурных белков р15, р12 и р30. В составе этого белка идентифицировано 6 фосфопептидов, специфичных для уникального компонента P120gag-abl, которые фосфорилируются как in vivo, так и in vitro по одному и тому же тирозину [Rosenberg N. et al., 1980; Reynolds F. U. et al., 1982].

Причем доминирующим был NН2-концевой фрагмент с массой 45 000. Несмотря на сходство продуктов реакции in vivo и in vitro, по данным иммунопреципитации и электрофореза в геле, совершенно иная картина наблюдалась при анализе методом двумерного электрофореза после обработки препаратов химотрипсином А.

В этом случае подвижность большинства пептидов P120gag-abl, меченного in vivo и in vitro, значительно различалась. Среди них были пептиды, меченные как по серину, так и по тирозину [Witte О. N. et al., 1981].

Известно 4 штамма A-MuLV отличающиеся по размеру трансформирующих белков-продуктов гена abl: P160gag-abl, P120gag-abl, P100gag-abl и P90gag-abl. Все эти белки содержат антигенные детерминанты gag-белков MuLV и соответствующие, варьирующие по размерам уникальные фрагменты [Rosenberg N. et al., 1980].

P120gag-abl обладает фосфокиназной активностью. Около 50 % A-MuLV-специфических последовательностей, присутствующих в P160gag-abl, отсутствуют в P90gag-abl. Для всех 4 штаммов A-MuLV характерна сходная эффективность трансформации фибробластов. Однако обнаружены существенные различия при трансформации лимфоидных клеток. Так, мутанты, кодирующие P100gag-abl и P90gag-abl, оказались дефектными по способности трансформировать клетки костного мозга и индуцировать лимфомы у мышей. Кроме того, обнаружены изменения в метаболизме и функциональных свойствах этих белков.

Для лимфоидных клеток, трансформированных указанными мутантами, характерны аномально высокие количества синтезируемых P100gag-abl и P90gag-abl, но молекулы этих белков менее стабильны, чем молекула P120gag-abl. P100gag-abl и P90gag-abl дефектны и по протеинкиназной активности.

С помощью двумерного электрофореза в геле установлено, что P120gag-abl содержит 9 основных фосфопротеидов, в P90gag-abl, в котором отсутствует последовательность с массой 30 000 с СООН-конца, нет фосфопептида 7.

Существенные различия обнаружены у P160gag-abl и P129gag-abl: для них 6 фосфопептидов — общие, уникальные 3 — для P120gag-abl и 5 — для P160gag-abl [Ponticelli A. S. et al., 1982].

Показано, что часть последовательностей продукта v-abl высокогомологична (более чем на 50 %) с онкобелками генов v-src, v-fps, v-fes и v-yes [Baltimore D. et al., 1983; Wang J. Y., 1983]. Из генов v- и c-abl, обладающих фосфопротеинкиназной активностью, выделен фрагмент размером 0,14 кб, который, вероятно, представляет собой активный участок протеинкиназы.

Проведено сравнительное исследование этого фрагмента с соответствующими участками других онкогенов, обладающих фосфопротеинкиназной активностью (v-src, v-fps, v-fes, v-yes и v-ros). Оказалось, что из последовательности в 96 аминокислот 38 были общими для всех 6 изученных продуктов онкогенов и все они содержали остаток тирозина в одном и том же положении [Crofben J. et al., 1983].

Меньшая гомология обнаружена между продуктами онкогенов аЫ и mos [Reddy Е. Р. et al., 1983]. Выявлена значительная гомология (28 из 96 остатков) между c-abl и каталитической субъединицей цАМФ-зависимой фосфопротеинкиназой млекопитающих.


«Онкогены и канцерогенез», А.И.Агеенко

Вперед →