Активность ферментов в сфере мембранного пищеварения исследовали соответственно принципам, разработанным А. М. Уголевым. Аспирационную биопсию тощей кишки производили с помощью зонда Шайнер. В смывах с поверхности кусочка интактной слизистой оболочки кишки исследовали активность транслоцированной инвертазы и адсорбированных на поверхности α-амилазы и липазы (фракция «П») — показатель, характеризующий активность ферментов на кишечных мембранах. В гомогенате слизистой оболочки тощей кишки определяли инвертазу, γ-амилазу, липазу. Активность ферментов в гомогенате отражает общий запас энзимов в энтероците, т. е. характеризует процессы синтеза ферментов (фракция «Г»).
Инвертазу определяли по приросту редуцирующих сахаров при помощи цветной реакции с о-толуидином. Активность фермента выражали в микрограммах гидролизованной сахарозы на 1 мг влажного веса ткани за 1 мин инкубации (в прежних публикациях активность фермента выражали в милиграмм-процентах редуцирующих Сахаров в 100 мл раствора на 1 мг влажного веса ткани за 1 ч инкубации).
Амилазу определяли по Смиту и Рое. Активность ее выражали в микрограммах гидролизованного крахмала на 1 мг влажного веса ткани за 1 мин инкубации. Липазу (трибутириназу) определяли сталагмометрическим методом в модификации А. М. Уголева, активность энзима выражали в микрограммах гидролизованного трибутирина на 1 мг влажного веса за 1 мин инкубации (методики см. подробно: Фролькис, 1973). Биопсию тощей кишки и исследование ферментов производили дважды, до и после лечения. Во время наблюдений больные не получали других препаратов, могущих повлиять на активность энтеральных энзимов. Действие ряда препаратов изучалось также in vitro, когда к части кусочка слизистой оболочки тощей кишки добавляли в пробирке тот или иной препарат, другая часть кусочка служила контролем. Обе пробы ставились параллельно, методика исследования была идентичной.
Исследования проводились у больных с гастроэнтерологической патологией (хронические энтероколиты, гастриты, язвенная болезнь, холециститы и др.), у которых с диагностической целью была показана еюнобиопсия, а назначение фармакологических средств было вызвано терапевтическими соображениями (смотрите таблицу ниже).
Распределение обследованных по нозологическим формам
Препарат | Фермент | n | Диагноз | ||||
язвенная болезнь | хронический | прочие | |||||
гастрит | энтероколит | холецистит, гепатит | |||||
Коронтин | Амилаза | 21 | — | 7 | 9 | 4 | 1 |
Липаза | 11 | — | 3 | 7 | 1 | — | |
Инвертаза | 10 | — | 2 | 8 | — | — | |
Неробол | Амилаза | 8 | — | 1 | 5 | 1 | 1 |
Липаза | 8 | 1 | 2 | 3 | 1 | 1 | |
Преднизолон | Амилаза | 00 | — | 2 | 3 | 1 | 2 |
Липаза | 00 | — | 2 | 3 | 1 | 2 | |
Эфедрин | Инвертаза | 11 | — | 4 | 6 | — | 1 |
L-ДОФА | Инвертаза | 7 | 7 | — | — | — | — |
Тразикор | Инвертаза | 9 | — | 2 | 6 | — | 1 |
Эуфиллин | Инвертаза | 14 | — | 7 | 2 | 3 | 2 |
Фолиевая кислота | Инвертаза | 8 | — | 4 | 4 | — | — |
Фенобарбитал | Инвертаза | 19 | 3 | 3 | 5 | 7 | 1 |
Интестопан | Инвертаза | 11 | — | — | 8 | — | 3 |
Сульфасала- зин | Инвертаза | 11 | — | — | 8 | — | 3 |
Потесептил | Инвертаза | 11 | — | — | 7 | 2 | 2 |
Тетрациклин | Инвертаза | 13 | — | 1 | 6 | 5 | 1 |
«Фармакологическая регуляция функций кишечника»,
А.В.Фролькис