Туберкулезные палочки в посевах патологического материала довольно трудно выделяются на искусственных средах, медленно развиваются, и культуры их появляются на 3 — 4-й неделе. Сильно мешает развитию туберкулезной палочки в культурах вторичная бактериальная флора, обычно менее прихотливая и быстро растущая. Для выращивания туберкулезных палочек и выделения их в чистых культурах в нашем институте свыше 20 лет пользуются обработкой материала серной кислотой по Левенштейну-Сумийоши в модификации Гона и посевами материала на специальных яичных средах Дорсэ, Любенау и нашего сотрудника И. С. Виноградова.
Обработка материала по Гону
Гной в количестве 3 — 5 см3 наливают в цилиндр с притертой пробкой:
Время воздействия серной кислоты (обработка и посев) не должно превышать 20 — 30 минут.
Яично-картофельная среда И. С. Виноградова:
Среда Любснау: к свежему яйцу (белок и желток) прибавляют 1 часть 5% глицеринового бульона, смесь взбалтывают в колбе с бусами до гомогенизации, затем профильтровывают через марлю и разливают по 5 см3 в пробирки, которые в косом положении прогревают в аппарате свертывания.
Среда Дорсэ: к свежему яйцу (один желток) прибавляют 1 часть 5% глицеринового бульона, затем взбалтывают в колбе с бусами до гомогенизации, профильтровывают через марлю и разливают по 5 см3 в пробирки, которые в косом положении прогревают в аппарате свертывания.
Для выращивания туберкулезных палочек необходима постоянная температура 37 — 38° термостата; отклонение в ту или другую сторону неблагоприятно отражается на развитии туберкулезной палочки.
По такой методике, как показали наши исследования (И. С. Виноградов, А. Н. Советова, А. А. Городкова, Н. М. Соколова), а также исследования других советских авторов (Ф. М. Акопова, Р. Т. Баум, Е. Иванова и др.), из гноя больных костно-суставным туберкулезом получают культуры туберкулезной палочки в 60 — 70% случаев.
А. А. Городкова, наблюдая за ростом туберкулезной палочки на плотных средах, установила, что методом микроскопического исследования посевов можно обнаружить микрокультуры туберкулезных палочек уже на 6 — 8-й день.
Для этого с места посева патологического материала на плотные среды берут частицу петлей, внося в капельку воды на предметном стекле, растирают, подсушивают, фиксируют и окрашивают по Циль-Нильсену. Обилие кислотоупорных палочек свидетельствует о развитии туберкулезных палочек, об их микрокультурах.
Отсев на свежие среды позволяет быстрее получить видимый рост в культурах.
«Костно-суставной туберкулез», П.Г.Корнев