Экскреция с мочой пуринов и их метилированных производных у больных лейкозом с различным содержанием соединений витамина В12 в крови

В конце прошлого столетия Kriiger и Salmon (1898) впервые выделили из большого количества мочи человека гипоксантин, ксантин, аденин и 7-метилгуанин. В 1947 г. Vischer и Chargaff, а годом позже Hotchkiss сообщили о выделении азотистых оснований нуклеиновых кислот, используя хроматографию на бумаге. Cohn (1949) для этой цели применил также метод ионообменной хроматографии. Тем самым была получена возможность выделения, идентификации и количественного определения пуриновых и пиримидиновых соединений в различных биологических системах.

В 1954 г. Weissmann и соавторы сообщили результаты исследования пуринов в моче здорового человека с помощью хроматографического метода; было найдено, что различные метилированные пурины (1-метилгуанин, 7-метилгуанин, 8-оксй-7-метилгуанин, 1-метилгипоксантин, N2— метилгуанин), содержатся в нормальной моче человека. Указанные соединения образуются в результате как катаболических, так и анаболических процессов (Weissmann е. а., 1957; Park е. а., 1962; Ф. Келбел, 1965).

Результаты наших собственных исследований экскреции пуринов у больных лейкозам с учетом содержания соединений В12 в крови подтвердили присутствие в моче человека различных производных пуринов. В наших исследованиях количество пуринов в моче выявлялось методом Вейсманна и соавторов (1957).

Соответственно этому пуриновые основания абсорбировались из мочи на ионообменной смоле дауэкс 50X4 (100—200 меш.). Разделение пуринов осуществлялось далее путем двухмерной хроматографии на бумаге в следующих системах растворителей: 1 н. бутанол — 0,6 н. NH4OH (6 : 1) и 1 н. бутанол — 88% муравьиная кислота — вода (66:11:12) (Н. В. Мясищева и др., 1970).

Соответственно положению соединения на двухмерной хроматограмме, величине Rf и характеру поглощения в ультрафиолетовой области спектра нами были идентифицированы аденин, гуанин, гипоксантин и их метилированные производные: 1-метилгуанин, 7-метилгуанин, N2— метилгуанин, 8-ОН-7-метилгуанин, 1-метилгипоксантин. Специфические коэффициенты экстинкций при определенных длинах волн, свойственные исследуемым соединениям, также являлись одним из критериев идентификации пуринов.

Своеобразие обменных процессов при нарушении нормального распределения кобаламинов в организме больного подтвердили данные, полученные нами при изучении экскреции пуринов. Средние данные интенсивности экскреции пуринов с мочой по отдельным группам заболевания с учетом содержания соединений витамина В12 в крови больных представлены в таблице ниже.

Интенсивность экскреции пуринов и их метилированных производных в моче больных лейкозом с различным содержанием соединений витамина В12 в крови (средние данные по отдельным группам заболеваний)

Диагноз Нормальнай концентрация Повышенная концентрация
количество
больных
содержание пуринов в моче (в % к верхней границе нормы) количество
больных
содержание пуринов в моче (в % к верхней границе нормы)
аденин гуанин
гипоксантин
метилированные
пурины
аденин гуанин,
гипоксантин
метилированные
пурины
Острый лейкоз 3 181 188 129 4 257 151 639
Хронический миелолейкоз 4 237 217 353
Хронический лимфолейкоз 3 163 100 127 1* 182 170 147
Остеомиелосклероз 1 102 100 116
Доноры 2 11З 100

* У больного, помимо хронического лимфолейкоза, был обнаружен рак желудка с метастазами в печень.


«Роль эндогенных факторов в развитии лейкозов»,
под ред. проф. М.О. Раушенбаха