В конце прошлого столетия Kriiger и Salmon (1898) впервые выделили из большого количества мочи человека гипоксантин, ксантин, аденин и 7-метилгуанин. В 1947 г. Vischer и Chargaff, а годом позже Hotchkiss сообщили о выделении азотистых оснований нуклеиновых кислот, используя хроматографию на бумаге. Cohn (1949) для этой цели применил также метод ионообменной хроматографии. Тем самым была получена возможность выделения, идентификации и количественного определения пуриновых и пиримидиновых соединений в различных биологических системах.
В 1954 г. Weissmann и соавторы сообщили результаты исследования пуринов в моче здорового человека с помощью хроматографического метода; было найдено, что различные метилированные пурины (1-метилгуанин, 7-метилгуанин, 8-оксй-7-метилгуанин, 1-метилгипоксантин, N2— метилгуанин), содержатся в нормальной моче человека. Указанные соединения образуются в результате как катаболических, так и анаболических процессов (Weissmann е. а., 1957; Park е. а., 1962; Ф. Келбел, 1965).
Результаты наших собственных исследований экскреции пуринов у больных лейкозам с учетом содержания соединений В12 в крови подтвердили присутствие в моче человека различных производных пуринов. В наших исследованиях количество пуринов в моче выявлялось методом Вейсманна и соавторов (1957).
Соответственно этому пуриновые основания абсорбировались из мочи на ионообменной смоле дауэкс 50X4 (100—200 меш.). Разделение пуринов осуществлялось далее путем двухмерной хроматографии на бумаге в следующих системах растворителей: 1 н. бутанол — 0,6 н. NH4OH (6 : 1) и 1 н. бутанол — 88% муравьиная кислота — вода (66:11:12) (Н. В. Мясищева и др., 1970).
Соответственно положению соединения на двухмерной хроматограмме, величине Rf и характеру поглощения в ультрафиолетовой области спектра нами были идентифицированы аденин, гуанин, гипоксантин и их метилированные производные: 1-метилгуанин, 7-метилгуанин, N2— метилгуанин, 8-ОН-7-метилгуанин, 1-метилгипоксантин. Специфические коэффициенты экстинкций при определенных длинах волн, свойственные исследуемым соединениям, также являлись одним из критериев идентификации пуринов.
Своеобразие обменных процессов при нарушении нормального распределения кобаламинов в организме больного подтвердили данные, полученные нами при изучении экскреции пуринов. Средние данные интенсивности экскреции пуринов с мочой по отдельным группам заболевания с учетом содержания соединений витамина В12 в крови больных представлены в таблице ниже.
Интенсивность экскреции пуринов и их метилированных производных в моче больных лейкозом с различным содержанием соединений витамина В12 в крови (средние данные по отдельным группам заболеваний)
Диагноз | Нормальнай концентрация | Повышенная концентрация | ||||||
количество больных |
содержание пуринов в моче (в % к верхней границе нормы) |
количество больных |
содержание пуринов в моче (в % к верхней границе нормы) | |||||
аденин |
гуанин гипоксантин |
метилированные пурины |
аденин |
гуанин, гипоксантин |
метилированные пурины |
|||
Острый лейкоз | 3 | 181 | 188 | 129 | 4 | 257 | 151 | 639 |
Хронический миелолейкоз | — | — | — | — | 4 | 237 | 217 | 353 |
Хронический лимфолейкоз | 3 | 163 | 100 | 127 | 1* | 182 | 170 | 147 |
Остеомиелосклероз | 1 | 102 | 100 | 116 | — | — | — | — |
Доноры | 2 | 11З | 100 | — | — | — | — | — |
* У больного, помимо хронического лимфолейкоза, был обнаружен рак желудка с метастазами в печень.
«Роль эндогенных факторов в развитии лейкозов»,
под ред. проф. М.О. Раушенбаха